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大肠杆菌引起腹泻的测试(GB方法介绍)
作者: 365bet彩票投注站 来源: dedecms模板 发布日期:2019-11-13 07:44 查看次数:
专心
在灭菌过程中称取25 g,添加到225 ml营养肉汤中,并用均化器压扁1分钟,或用粉尘和无菌沙子研磨。
收集适量,接种胆汁乳糖培养基,测定大肠杆菌MPN,将剩余的转移至500 ml瓶中,于36°C在1°C孵育6小时。
收集环并接种到30ml肠细菌培养管中,并在42℃下孵育18小时。
分离
乳糖胆汁盐发酵管和乳糖发酵阳性的浓缩液分别接种在MacConkey或曙红蓝琼脂平板上。如果污染严重,您可以直接向MacKay或Yihongmei注册样品。蓝板在36oC和1oC下生长18-24小时,并观察到菌落。
不仅应注意乳糖发酵菌落,而且还应注意乳糖不发酵而缓慢发酵的菌落。
附件:MacConkey琼脂平板的照片
EMB平板电脑原理和照片
生化测试:
直接从鉴定板中收集了几个菌落,并接种到三糖铁琼脂(TSI)或Krebs二糖铁琼脂(KI)中。
同时,将这些培养物分别接种蛋白pH,半固体水(pH 7)。
2尿素琼脂,KCN肉汤和赖氨酸脱羧酶测试培养基。
先前的培养物在36°C下生长过夜
TSI的斜率产生酸或不产生酸,下层产生酸。H2S阴性,KCN培养阴性,尿素阴性。
TSI的下层不产生酸,并且H2S,KCN和尿素阳性培养物不是大肠杆菌。
根据需要进行氧化酶测试和革兰氏染色。
附件:三糖铁琼脂(TSI)的原理和照片
克雷布斯二糖铁琼脂照片
脲酶测试的原理和照片
血清学检查
假设检验:使用病原性大肠杆菌,侵入性大肠杆菌,产生肠毒素的大肠杆菌O血清,大肠杆菌O157出血性血清通过大肠杆菌的生化测试确认的琼脂培养基的载玻片选择
当与特定的多价O血清聚集时,用多价血清中包含的单价O血清进行测试。
与特定的一价O血清发生强烈的凝集反应被认为是阳性的。
确认测试:制备O抗原悬浮液,并稀释至与MacFarland 3号浊度管相当的浓度。
或效价为1:160至1:320、0的血清。
用5%的盐水稀释1:1。
将稀释的血清与等量的抗原悬液在10 mm和75 mm试管中混合,以进行单管凝集试验。
混合后,置于50°C水浴中,观察16小时后的结果。
如果发生聚集,则可以确认为O抗原。
附件:大肠杆菌腹泻和O血清。
肠毒素测试(产生毒素的大肠杆菌)(热不稳定肠毒素LT,热稳定肠毒素ST)
1 ELISA和ELISA用于检测LT和ST。
两次双向琼脂扩散测试以检测LT
3 ST泌乳大鼠胃部检查
附件:肠毒素测试
结果报告
有关生化测试,血清学测试和以前的肠毒素测试的报告。
编辑:foodyy


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